高伟教授团队最新研究成果登上国际权威期刊

近日，东南大学附属中大医院老年医学科高伟教授联合东南大学化学化工学院张春阳教授团队，在国际权威期刊《Sensorsand Actuators: B. Chemical》（中科院一区）发表了题为“Ligation-drivenhyperbranched DNA assembly for label-free and sequence-specificmeasurement of RNA N-methyladenosinein human breasttissues”的研究成果，该研究开发了一种基于连接反应驱动的超支化DNA荧光生物传感器，用于组织中mA修饰的测定。该方法在与mA相关的表观遗传学和临床诊断中具有良好的应用前景。

据介绍，N-甲基腺苷(N-methyladenosine，mA)是一种广泛存在于真核生物mRNA中最丰富的化学修饰之一，可以通过多种机制影响机体生物学过程及疾病（如肿瘤、免疫功能障碍、神经退行性疾病等）的发生发展。目前针对mA修饰的检测方法存在样本需求量大、检测步骤繁琐以及假阳性等一系列问题。因此，迫切需要开发一种更为敏感且特异性更高的mA修饰检测方法。

图1连接反应驱动的超支化DNA荧光生物传感器用于非标记、序列特异性检测mA修饰的示意图

图2图文摘要

本研究重点介绍了连接反应驱动的超支化DNA荧光生物传感器，在人乳腺肿瘤组织中非标记、序列特异性的检测mA修饰。在该检测中，未甲基化的RNA可以被对mA敏感的内切核酸酶MazF识别并切割。保留的完整mARNA与锁式探针互补，形成环状DNA，随后启动连接反应驱动的超支滚环扩增（HRCA）。获得的HRCA产物可用SYBRGold作为荧光指示剂进行定量检测。该检测方法能够在恒温、非标记、无抗体的条件下进行，且检测限（limitof detection，LOD）达0.079pM，并能够在存在大量混杂信号的背景下检测出0.01%的mA修饰，达到了单细胞水平的检测敏感性，能够精准区分乳腺肿瘤组织与正常组织间的mA修饰水平。

该研究开发了一种具有高度灵敏性和选择性的序列特异性mA修饰检测方法，将有助于推动mA修饰相关检测方法在临床诊断中的应用。（编辑刘敏 编审程守勤）