生物化学简答题-第34章基因工程、蛋白质工程及相关技术

1.PCR技术(PCR的基本原理)?简要介绍PCR技术的应用和发展。 PCR,聚合酶链式反应，是DNA的体外酶促扩增，故又称为无细胞分子克隆法。 ①设计一对引物以便有效扩增所需要的DNA序列，并尽量减少可能产生的非特异性产物 ②优化反应体系，以便获得最好的扩增效果，该反应体系包括适量模板、引物、4种dNTP(200umol/L)、TaqDNA聚合酶、Mg2+。 ③首先使DNA变性，两条链解开，变性：94度，45-60s 然后使引物模板退火，二者碱基配对，退火：两引物中较低的Tm值减2,1min； DNA聚...【查看原文】