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包含体的分离、溶解过程是怎样的?

作者:维真生物发布时间:2024-09-27

在外源基因的原核表达中,有的表达产物以不溶性的包含体的形式存在。这些包含体就 需要再分离出来后进行再溶解。 包含体的分离、洗涤与溶解 菌体细胞破碎后,包含体会释放出来,通过离心法可进行固液相分离,使包含体与上清 液中的细胞碎片及杂蛋白分开。与包含体同时被离心沉淀下来的物质还包括可溶性杂蛋白、 RNA 聚合酶的四个亚基、细菌外膜蛋白、16S rRNA和23S rRNA、质粒DNA 以及脂质、 肽聚糖、脂多糖等。可先用 TE 缓冲液反复洗涤以除去可溶性蛋白、核酸以及外加的溶 菌酶。 在包含体溶解前,常用低浓度...【查看原文】


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