冻存细胞时要缓慢冷冻。因为细胞在不加任何保护剂的情况下直接冻存,细胞内外的水分会很快形成冰晶,并且随冰晶数量增多,会导致细胞脱水及渗透压增高等后果,从而造成细胞的损伤。目前细胞冻存多采用甘油或二甲亚砜作为保护剂,这两种物质在低温冷冻后对细胞均无明显毒性,并且分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性;加上缓慢冻存可使细胞内的水分渗出细胞外,在胞外形成冰晶,减少细胞内冰 晶的形成,从而减少由于冰晶形成所造成的细胞损伤。标准的冷冻速度开始为-2~-1℃/min, 当温度低于-25℃...【查看原文】