确定蛋白质的氨基酸序列是蛋白质研究的基础,具有重要的科学价值。测定未知蛋白质的氨基酸序列可以通过以下几个步骤:蛋白质纯化、蛋白质酶解、液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)分析、数据库搜索。 一、蛋白质纯化 首先需要将目标蛋白质从复杂的生物样品中纯化出来;这通常可以通过离心、沉淀、色谱等方法实现。 二、蛋白质酶解 蛋白质酶解是将蛋白质切割成较小的多肽片段,使其更易于进行下一步的分析,常用的酶包括胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等。 三、液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)分析 多肽片段通过液相色谱进行分离,然后通...【查看原文】