8月6日,赛业生物联合百英生物举办线上直播讲座,作主题为“抗体发现‘多快好省’方程式!百英生物AbDrop™携手赛业生物HUGO-Ab®倾情打造高通量全人源抗体发现平台”的直播讲座及圆桌讨论,以下为本次直播常见问题汇总与解答。
FAQ:
1.请问人的序列越全越好吗?可以人为排除一部分性质不好或者不常见的序列吗?
2.筛选阳性率有多少?一只小鼠可以富集多少个浆细胞?
3.流式、微流控目前不能做纳米抗体,赛业的纳米抗体鼠是不是可以做纳米抗体样本?
4.免疫动物的数量和筛选的单B细胞数量哪个对抗体多样性影响更大?
5.共轻链小鼠中的VK敲入小鼠可以用来做双特异性抗体吗?
6.赛业的抗体鼠人源化没有使用CRISPR,请问使用的什么方法呢?
7.共同轻链小鼠筛选出来的共轻链抗体比例有多大?
8.全人源化抗体是否只有免疫原性低的优点?纳米抗体是否具有更多优势?
圆桌沙龙|高通量全人源抗体发现平台解锁抗体发现“多快好省”新策略
Q
请问人的序列越全越好吗?可以人为排除一部分性质不好或者不常见的序列吗?
A
虽然产生高亲和力抗体的胚系基因使用频率主要都集中高频出现的那一部分基因中,但更加全面的胚系基因能够为高难度靶点,困难表位的筛选提供更多的可能和潜力。
Q
筛选阳性率有多少?一只小鼠可以富集多少个浆细胞?
A
正常项目阳性率在0.5%左右。一只小鼠浆细胞约2×106cell。
Q
流式、微流控目前不能做纳米抗体,赛业的纳米抗体鼠是不是可以做纳米抗体样本?
A
传统的纳米抗体样本来源主要是羊驼或者鲨鱼的血清,通过噬菌体展示技术进行筛选。纳米抗体鼠在B细胞的采集更加的灵活和方便,可以采集脾脏,淋巴结等组织,且有足够多的B细胞数量。使用纳米抗体鼠可轻松通过流式或微流控单B技术平台进行抗体筛选。
Q
免疫动物的数量和筛选的单B细胞数量哪个对抗体多样性影响更大?
A
小鼠之间存在个体差异,将多只小鼠B细胞混在一起进行抗体筛选是个不错的方法,但是如果筛选通量不够,也很难获得目标分子。单B细胞计数能够实现B细胞高通量的筛选,最大可能的获得目标分子。
Q
共轻链小鼠中的VK敲入小鼠可以用来做双特异性抗体吗?
A
赛业生物研发的共同轻链抗体鼠有8种Kappa单基因固定的小鼠,也有2种固定了4个kappa轻链的小鼠,都可以用于双特异性抗体的开发。单基因固定轻链小鼠可能会存在重链不匹配的问题,4基因固定轻链小鼠就能够解决这个问题。
Q
赛业的抗体鼠人源化没有使用CRISPR,请问使用的什么方法呢?
A
基于赛业自主专利的TurboKnockout® ES打靶技术实现大基因组片段敲入构建了HUGO-Ab®小鼠,使后代的基因型和表型更加稳定,且无专利风险。
Q
共同轻链小鼠筛选出来的共轻链抗体比例有多大?
A
使用不同靶点免疫共同轻链小鼠产生的抗体都是同一条轻链。经过我们内部验证,筛选出的轻链序列大约70%的轻链与母本完全一致,剩下的也只是个别的点突变,对使用没有影响。
Q
全人源化抗体是否只有免疫原性低的优点?纳米抗体是否具有更多优势?
A
全人源抗体首先免去了鼠源抗体的人源化改造对抗体亲和力和理化性质带来的负面影响,其次缩短了开发的时间周期。纳米抗体由于在结构和功能上与传统的IgG抗体存在差别,各有优点,不能代替。