怎么提高质粒转染的效率？
为了提高转化效率，实验中要考虑以下几个重要因素： (1)细胞生长状态和密度 不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌，最好使用从单克隆菌落制备的新鲜菌液，细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好，可通过监测培养液的 OD600来控制。DH5α 菌株的OD600为0.5时，细胞密度在5×10⁷个/mL 左右(不同的菌株 情况有所不同),这时比较合适。密度过高或不足均会影响转化效率。 (2)质粒的质量和浓度 用于转化的质粒DNA 应主要是超螺旋态 DNA(cccDNA) 。 转化效率与外源DNA 的浓度在一定范围内成...【查看原文】
